Биолюминесцентный сенсор для изучения кинетики и механизма действия антибиотиков на клетки бактерий

Abstract

Живые клетки E.coli, продуцирующие рН-резистентную термостабильную люциферазу светляков, использованы для создания биолюминесцентного сенсора для изучения кинетики и механизма действия антибиотиков на клетки бактерий по изменению содержания АТР и активности продуцируемого фермента внутри и вне клеток. Это позволяет уже на начальном этапе воздействия в динамике изучать различные патологии клетки (жизнеспособность, проницаемость клеточной мембраны, функционирование рибосом и системы синтеза/гидролиза АТР) и быстро оценить эффективность действия лекарственных средств. Проведено сравнение антибиотиков полимиксинового ряда и аминогликозидов на клетки E.coli, которое показало, что полимиксины проявляют бактерицидный эффект, воздействуя прежде всего на систему синтеза АТР. В присутствии аминогликозидов наблюдался бактериостатический эффект – в клетках сохранялся высокий уровень ATPin и Lucin, клетки оставались жизнеспособными, хотя и утратили способность к делению. Метод удобен для оценки цитотоксичности различных агентов и скрининга лекарственных средств.

Speaker

Lomakina G.Yu.
Lomonosov Moscow State University
Russia

Discussion

Ask question